沙门氏菌试纸片说明书
一、原理
测试片含有沙门氏菌培养基、选择性抑制剂、显色底物和冷
水总大肠菌群/大肠杆菌(100mL)即用型干粉培养基说明书本培养基由营养成分、选择性抑制剂和显底物组成。营养成分提供大肠菌群/大肠杆菌生长所需营养;选择性抑制剂可有效抑制其它菌的生长;大肠菌群含有β-半乳糖苷酶,分解ONPG显黄;大肠杆菌同时含有β-半乳糖苷酶和β-葡萄糖醛酸酶,能同时分解ONPG和MUG,水样变黄的同时,在紫外灯下显蓝白荧光。
GB 5750.12-2006(酶底物法);NY/T 1665-2008(定性检测)。
水可溶性凝胶。培养基提供沙门氏菌生长所需营养;选择性抑制剂可有效抑制其它细菌生长;当有沙门氏菌生长繁殖,显色底物被分解,游离出显色基团,可疑沙门氏菌菌落呈黑色或红色并伴有紫色晕圈。可疑沙门氏菌需经反应确认片确认后才可判定是否为沙门氏菌。
二、包装规格
25片/包。
三、检验方法
1.增菌
按GB 4789.4方法增菌,最好能完成2步增菌,如果条件不允许,至少要保证1步增菌。
2水化测试片
将测试片置于水平台面,揭开上层薄膜,吸1mL样品稀释液滴加于培养层(最好于两条斜对角线滴加,扩散更快,并可避免气泡产生),盖上上层薄膜,不可叠放(否则易漏液),于水平台面静置1h,也可提前一天水化,并冷藏,第二天使用。
3.划线接种
揭开上层薄膜,挑1接种环增菌后的样液之字形划线,从头划到尾,中间不必灼烧杀菌。
4.培养
接种后的测试片叠放(不多于10片),36℃±1℃培养16h-18h。培养时注意保湿(于培养箱下层放置一湿盒或者其它容器,倒入2L-3L水即可)。
5.判读
培养结束后取出测试片,黑色或红色伴有紫色晕圈的菌落为可疑沙门氏菌,需进一步验证;若无黑色或红色伴有紫色晕圈的菌落,直接报阴性结果。
6.反应确认实验
将测试片上黑色有紫色晕圈的菌落用黑色笔在上层膜进行标记;红色有紫色晕圈的菌落用红色笔进行标记,并在背面相应的位置也进行标记。
反应确认片分为2种:黑色有紫色晕圈的菌落用反应确认片1进行验证;红色有紫色晕圈的菌落用反应确认片2进行验证。
水化反应确认片:方法同测试片
接种:揭开上层膜。用接种针挑取黑色有紫色晕圈的菌落点种在反应确认片1上;挑取红色有紫色晕圈的菌落点种在反应确认片2上。
培养:接种后的测试片叠放(不多于10片),36℃±1℃培养24h±2h,并注意保湿。
判读:反应确认片1出现红色菌落,背景为紫色判为沙门氏菌阳性;红色菌落伴有黄色晕圈为阴性。反应确认片2出现红色无蓝环菌落为沙门氏菌阳性;红色有蓝环菌落为阴性。
四、储存
阴凉避光处保存,保质期1年;开封后放于自封口袋中于室温保存,并于1个月内用完。