食品中的李斯特氏菌检验测试片
深圳市艾瑞斯仪器有限公司
1 原理及适用范围
李斯特菌测试片是一种预先制备好的一次性培养基产品,含有基础营养培养基、选择性试剂、特殊生长促进剂、冷水可溶性吸水凝胶和β-D-葡萄糖苷酶(β-D-glucosidase)的显色底物,李斯特菌
GB 5750.12-2006(酶底物法);NY/T 1665-2008(定性检测)。拧开瓶盖,将100mL水样倒入瓶中摇匀,使培养基溶解,拧紧瓶盖。
36℃±1℃培养24h。
培养结束后取出培养瓶,水样变黄为大肠菌群阳性;水样变黄同时在紫外灯下显蓝白荧光为大肠杆菌阳性。培养瓶应拧紧瓶盖,倒放在紫外灯上观察荧光。因为紫外光穿透力弱,仅能使液体表面显荧光。如果结果为可疑阳性,可延长培养时间到28h。单位为检出或未检出/100mL。废弃物需经121℃高压灭菌20分钟后处理。
测试片适用于检测或者计数食品及环境样品中的李斯特菌菌数。李斯特菌测试片检测的李斯特菌包括单核细胞增生李斯特菌(Listeria.monocytogenes),英诺克李斯特菌(Listeria.innocua),威氏李斯特菌(Listeria.welshi),但不能区分各种菌。
2 操作方法
2.1 样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225 mL灭菌磷酸缓冲液稀释液(或生理盐水)的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液。
2.2 接种:将测试片置于平坦实验台面,翻开测试片盖膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液均匀地滴加到纸片上,等待纸片完全吸收液体,慢慢放下盖膜,每个稀释度接种两片。同时做一片空白阴性对照。
2.3 培养:将测试片叠在一起置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。
3 结果判读
在测试片上生长的蓝绿色点即为李斯特菌阳性点,若检测板上无菌生长或者长出点为其他颜色点即为李斯特菌阴性。出现阳性菌落的样本,最好用其他更为可靠的方法进行验证。
4 报告方式
报告每25g(或25ml)样品中检出或未检出李斯特氏菌。
5 附加说明
注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理 。
6 保存条件
本产品需存放在2℃~8℃冰箱中,保质期为一年。