孟加拉红凝胶琼脂平板说明书
一、原理
孟加拉红凝胶琼脂平板以孟加拉红琼脂培养基为基础,添加冷水可溶性凝胶,使平板可吸收1mL样液,因此可用于样品检测;孟加拉红可有效抑制杂菌生长及霉菌的蔓延,并使酵母菌菌落显红色。
二、包装规格
10皿/包。
三、检验方法
参考NY/T 1331标准,制备样液。取10g或者25g固体/半固体样品,加90mL或者225mL预热至45℃的稀释液(磷酸盐缓冲液或者蛋白胨-盐溶液),制成10-1样液。如果有必要可以继续稀释,选择合适的稀释度备用。将测试片置于水平台面,揭开上层薄膜,吸1mL样液滴加于培养层,缓慢盖上上层薄膜,将匀液板有凹槽部分对准样液区域轻放于上层薄膜上,手指按住压环,同时在压环内轻轻按压,使样液在压环内扩散开,充满整个压环。粮食制品每个样品接种5片,接种好的测试片放于PET自封口袋中(5片/袋),封好口。乳及乳制品每个稀释度接种2片测试片,每片1mL样液,放入自封口袋中封好口。
1.样品制备
按常规方法制备样液,根据样品中霉菌和酵母菌数量推测选择2-3个连续稀释度备用。
2.接种
将凝胶琼脂平板取出,吸1mL样液分散滴加于凝胶琼脂表面,晃动平板,使样液均匀分散在凝胶琼脂表面,静置30min使样液完全被吸收。每个稀释度2个重复。对于粘稠样液,应用涂布器涂布,使样液分散均匀;或者加大稀释度降低样液粘度再接种。避免粘稠样液集中在某一处凝胶表面,因分散不均造成局部积液,吸收不完全,导致凝胶硬度低,霉菌易蔓延生长。
3.培养
接种后的凝胶琼脂平板正放(不可倒置,防止因台面不平,造成部分样液吸收不完全流至皿盖),于霉菌培养箱中28℃±1℃培养48h±2h(需放置湿盒保湿)。
4.计数
培养结束后取出凝胶琼脂平板,计数霉菌酵母菌数量。表面光滑湿润圆形凸起的菌落为酵母菌;绒毛状、絮状扩散生长的菌落为霉菌。废弃物需经121℃高压灭菌20分钟后处理。
四、储存
常温避光保存,当温度高于35℃时应注意适当降温,保质期6个月;已开封凝胶琼脂平板用橡皮筋扎好袋口,并于1个月内用完。