孟加拉红凝胶琼脂平板说明书
一、原理
孟加拉红凝胶琼脂平板以孟加拉红琼脂培养基为基础,添加冷水可溶性凝胶,使平板可吸收1mL样液,因此可用于样品检测;孟加拉红可有效抑制杂菌生长及霉菌的蔓延,并使酵母菌菌落显红色。
二、包装规格
10皿/包。
三、检验方法
接种好的测试片立即置于沸水浴或蒸汽柜中,粮食制品放置15min;乳及乳制品放置30min。蒸煮结束后将自封口袋打开5cm左右的口(以测试片培养时有充足的氧气供应),55℃±1℃保持一定湿度培养48h±2h。测试片好放于平整处培养(可在培养箱中放一小块纸板),不可直接放于铁丝架上培养,容易使凝胶受挤压变形。
培养结束后取出测试片,计数测试片上的红菌落。谷物样品以5片测试片上的菌落数总和,再乘以8即为10g样品中嗜热芽孢总数;面粉或淀粉样品以5片测试片上的菌落数总和,再乘以10即为10g样品中嗜热芽孢总数。乳及乳制品按NY/T 1331标准计数。废弃物需经121℃高压灭菌20分钟后处理。
1.样品制备
按常规方法制备样液,根据样品中霉菌和酵母菌数量推测选择2-3个连续稀释度备用。
2.接种
将凝胶琼脂平板取出,吸1mL样液分散滴加于凝胶琼脂表面,晃动平板,使样液均匀分散在凝胶琼脂表面,静置30min使样液完全被吸收。每个稀释度2个重复。对于粘稠样液,应用涂布器涂布,使样液分散均匀;或者加大稀释度降低样液粘度再接种。避免粘稠样液集中在某一处凝胶表面,因分散不均造成局部积液,吸收不完全,导致凝胶硬度低,霉菌易蔓延生长。
3.培养
接种后的凝胶琼脂平板正放(不可倒置,防止因台面不平,造成部分样液吸收不完全流至皿盖),于霉菌培养箱中28℃±1℃培养48h±2h(需放置湿盒保湿)。
4.计数
培养结束后取出凝胶琼脂平板,计数霉菌酵母菌数量。表面光滑湿润圆形凸起的菌落为酵母菌;绒毛状、絮状扩散生长的菌落为霉菌。废弃物需经121℃高压灭菌20分钟后处理。
四、储存
常温避光保存,当温度高于35℃时应注意适当降温,保质期6个月;已开封凝胶琼脂平板用橡皮筋扎好袋口,并于1个月内用完。